亚洲一卡一卡二新区无人区-国产精品爽爽久久久久久竹菊-久久婷婷大香萑太香蕉av人-国产精品久久久久久久久久久久午夜片-亚洲精品久久久久久久蜜臀老牛

010-56256916

技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章單克隆抗體制備的基本方法

單克隆抗體制備的基本方法

更新時(shí)間:2022-06-23點(diǎn)擊次數(shù):1438
  抗體是機(jī)體在抗原刺激下產(chǎn)生的能與該抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。常規(guī)的抗體制備是通過動(dòng)物免疫并采集抗血清的方法產(chǎn)生的,因而抗血清通常含有針對(duì)其他無關(guān)抗原的抗體和血清中其他蛋白質(zhì)成分。一般的抗原分子大多含有多個(gè)不同的抗原決定簇,所以常規(guī)抗體也是針對(duì)多個(gè)不同抗原決定簇抗體的混合物。即使是針對(duì)同一抗原決定簇的常規(guī)血清抗體,仍是由不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的異質(zhì)的抗體組成。
 
  單克隆抗體制備的基本方法:
  對(duì)抗原的要求是純度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如為細(xì)胞抗原,可取1×107個(gè)細(xì)胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加*福氏佐劑并經(jīng)充分乳化,如為聚丙烯酰胺電泳純化的抗原,可將抗原所在的電泳條帶切下,研磨后直接用以動(dòng)物免疫。
  選擇與所用骨髓瘤細(xì)胞同源的BALB/c健康小鼠,鼠齡在8~12周,雌雄不限。為避免小鼠反應(yīng)而不佳或免疫過程中死亡,可同時(shí)免疫3~4只小鼠。
  免疫過程和方法與多克隆抗血清制備基本相同,因動(dòng)物、抗原形式、免疫途徑不同而異,以獲得抗體為目的。免疫間隔一般2~3周。一般被免疫動(dòng)物的血清抗體效價(jià)越高,融合后細(xì)胞產(chǎn)生特異抗體的可能性越大,而且單克隆抗體的質(zhì)量(如抗體的濃度和親和力)也與免疫過程中小鼠血清抗體的效價(jià)和親和力密切相關(guān)。末次免疫后3~4天,分離脾細(xì)胞融合。
 
  在體外培養(yǎng)條件下,細(xì)胞的生長(zhǎng)依賴適當(dāng)?shù)募?xì)胞密度,因而,在培養(yǎng)融合細(xì)胞或細(xì)胞克隆化培養(yǎng)時(shí),還需加入其他飼養(yǎng)細(xì)胞(feedercell)。常用的飼養(yǎng)細(xì)胞為小鼠的腹腔細(xì)胞,制備方法為用冷凍果糖液注入小鼠腹腔,輕揉腹部數(shù)次,吸出后的液體中即含小鼠腹腔細(xì)胞,其中在巨噬細(xì)胞和其他細(xì)胞。亦有用小鼠的脾細(xì)胞、大鼠或豚鼠的腹腔細(xì)胞作為飼養(yǎng)細(xì)胞的。在制備飼養(yǎng)細(xì)胞時(shí),切忌針頭刺破動(dòng)物的消化器官,否則所獲細(xì)胞會(huì)有嚴(yán)重污染。飼養(yǎng)細(xì)胞調(diào)至1×105/ml,提前一天或當(dāng)天置板孔中培養(yǎng)。
熱線電話:010-56256916

關(guān)注公眾號(hào)

Copyright © 2025 安諾倫(北京)生物科技有限公司 版權(quán)所有    備案號(hào):京ICP備16059737號(hào)-3

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登錄    sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 久久久久久亚洲精品不卡| 真人做人试看60分钟免费| 亚洲成a人v在线蜜臀| 少妇粉嫩小泬喷水视频| 亚洲欧美综合精品成人网| 免费国产午夜高清在线视频| 潮喷失禁大喷水aⅴ无码| 亚洲午夜理论电影在线观看| 亚洲日本精品国产一区vr | 精品国产品香蕉在线| 蜜桃av噜噜一区二区三区小说| 成人乱码一区二区三区| 天堂一区人妻无码| 女人18片毛片60分钟| 国精无码欧精品亚洲一区| 国产一区二区无码专区| 欧美牲交a欧美牲交aⅴ另类| 97成人精品区在线播放| 亚洲av吞精一区| 韩国三级中文字幕hd久久精品| 久久成人免费观看草草影院| 欧美性受xxxx狂喷水| 广东少妇大战黑人34厘米视频| 国产成人a在线视频免费| 四虎影院中文欧美激情一区二区| 人人妻人人澡人人爽人人dvd| 国产精品久久久av久久久| 国产做爰又粗又大又爽动漫 | 国产粗话肉麻对白在线播放| 风流少妇一区二区三区91| 国产精品毛片无遮挡| 麻豆精品一区综合av在线| 日本边添边摸边做边爱喷水| 国产内射老熟女aaaa| 肉色超薄丝袜交一区二区| 无码国产精品一区二区免费vr | 精品一区二区三区视频男人吃奶| 精品国产亚洲第一区二区三区| 亚洲精品成人av在线| 东京热人妻中文无码| 中文字幕无码av激情不卡|