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當前位置:首頁技術文章熒光標記抗體檢測原理——艾柏森

熒光標記抗體檢測原理——艾柏森

更新時間:2024-08-23點擊次數:650

熒光標記抗體檢測的原理基于以下幾個關鍵概念:

 

特異性結合:抗體是一種能夠特異性識別并結合到特定抗原(目標分子)上的蛋白質。這種結合是高度特異性的,意味著一個抗體通常只與其對應的抗原結合。

 

 

熒光標記:熒光素是一種可以發出熒光的物質,當受到特定波長的光激發時,它會發出較長波長的光。將熒光素與抗體共價結合,形成熒光標記抗體。

 

 

熒光檢測:熒光標記抗體與抗原結合后,可以通過熒光顯微鏡、流式細胞儀或其他熒光檢測設備觀察到熒光信號。這些設備能夠檢測到非常微弱的熒光信號,從而實現對抗原的高靈敏度檢測。

 

 

直接法與間接法:

 

直接法:熒光素直接與特異性抗體結合,形成熒光標記的一抗,直接與目標抗原發生特異性結合。

間接法:首先使用未標記的一抗與目標抗原結合,然后使用熒光標記的二抗(針對一抗的抗體)與之結合,實現信號的放大。

 

信號放大:在某些情況下,為了提高檢測的靈敏度,可以使用信號放大技術,如生物素-鏈霉親和素系統或酶標記的酪氨酸系統。

 

 

多色檢測:通過使用不同顏色的熒光素標記不同的抗體,可以同時檢測多個抗原,這種技術稱為多色流式細胞術或多重免疫熒光。

 

 

定量分析:熒光的強度可以與抗原的量相關聯,從而實現定量分析。

 

熒光標記抗體檢測技術廣泛應用于生物學研究,包括細胞生物學、分子生物學、免疫學和臨床診斷等領域。通過這種技術,研究人員可以在細胞或組織樣本中定位特定蛋白質,研究蛋白質的表達模式,或者進行疾病的診斷和治療監測。

 


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