亚洲一卡一卡二新区无人区-国产精品爽爽久久久久久竹菊-久久婷婷大香萑太香蕉av人-国产精品久久久久久久久久久久午夜片-亚洲精品久久久久久久蜜臀老牛

010-56256916

新聞資訊

NEWS INFORMATION

當前位置:首頁新聞資訊單抗制備的生產及純化方法

單抗制備的生產及純化方法

更新時間:2022-09-13點擊次數:1014
  抗體是機體在抗原刺激下產生的能與該抗原特異性結合的免疫球蛋白。常規的抗體制備是通過動物免疫并采集抗血清的方法產生的,因而抗血清通常含有針對其他無關抗原的抗體和血清中其他蛋白質成分。一般的抗原分子大多含有多個不同的抗原決定簇,所以常規抗體也是針對多個不同抗原決定簇抗體的混合物。即使是針對同一抗原決定簇的常規血清抗體,仍是由不同B細胞克隆產生的異質的抗體組成。
 
  單抗制備的生產及純化方法:
 
  (1)動物體內生產單抗
 
  ①成年BALB/c小鼠腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。
 
  ②7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。
 
  ③間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可采集腹水。通常每只小鼠可采3ml腹水。
 
  ④將腹水離心(2000r/min5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,70℃凍存備用。
 
  (2)單克隆抗體的純化(辛酸-硫酸銨沉淀法)
 
  ①腹水4℃12000rpm離心15min,去除雜質。
 
  ②取1份腹水加2份0.06mol/LPH5.0醋酸緩沖液,按每毫升稀釋腹水加33ul辛酸的比例,室溫攪拌下逐滴加入辛酸,室溫混合30min。
 
  ③4℃靜置2小時,取出12000g離心30分鐘,棄沉淀。
 
  ④上清經尼龍篩過濾,于50倍體積的0.01MPH7.4PBS中4℃透析6h。
 
  ⑤在透析后的上清中加入等體積飽和硫酸銨溶液。
 
  ⑥4℃靜置1h以上,10000g離心30分鐘,棄上清。
 
  ⑦沉淀溶于適量PBS(含137mmol/LNaCl,2.6mol/LKCl,0.2mmol/L EDTA)中,于50-100倍體積的PBS中透析過夜。
 
  ⑧取少量透析后樣品適當稀釋后,以紫外分光光度計檢測蛋白含量,SDS-PAGE,抗體純度。
熱線電話:010-56256916

關注公眾號

Copyright © 2025 安諾倫(北京)生物科技有限公司 版權所有    備案號:京ICP備16059737號-3

技術支持:化工儀器網    管理登錄    sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 免费看无码自慰一区二区| 久久亚洲精品人成综合网| 欧美激情精品成人一区| av片亚洲国产男人的天堂| 亚洲日韩中文字幕在线播放| 日韩精品真人荷官无码| 欧美精品一区二区黄a片| 青青成线在人线免费啪| 法国少妇xxxx做受| 国产热の有码热の无码视频| 国产人妻久久精品二区三区特黄| 成人免费无码大片a毛片18| 韩国一区二区视频免费观看 | 日韩美免费一区二区三区| 蜜桃av一区二区三区精品人妻| 无码人妻丰满熟妇奶水区码| 天堂va在线高清一区| 亚洲精品一区二区三区福利| 性少妇中国内射xxxx狠干| 亚洲中文字幕无码一区二区三区 | 无码免费中文字幕视频| 国产毛片毛多水多的特级毛片| 国内精品人妻久久毛片app| 蜜臀久久99精品久久久久久| 色欲色香天天天综合网站免费| 国产大屁股白浆一区二区三区| 无码午夜成人1000部免费视频| 2021久久天天躁狠狠躁夜夜| 欧美三级在线播放| 秋霞在线观看秋| 精品无码久久久久久久久久| 精品一区手机在线观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡 精品| 人妻大战黑人白浆狂泄| 少妇高潮喷水久久久久久久久久| 亚洲中文字幕无码av在线| 激情视频 图片 日韩 一区| 免费无码又爽又刺激高潮的动漫| 亚洲高潮喷水无码av电影 | 国产免费久久精品99reswag| 一区二区在线观看黄片|